ПЦР. Туберкулез (ДНК Mycobacterium tuberculosis)

Аполипопротеины - это белковые компоненты липопротеинов. Они имеют большое значение в поддержании структурной целостности липопротеинов, узнавании липопротеинов рецепторами, а так же регуляции активности ферментов, действующих на липопротеины.

Основные аполипопротеины - Апо А, Апо В, Апо С и Апо Е и их подклассы, различающиеся метаболическими функциями. Подклассы аполипопротеинов А и С обозначаются римскими цифрами. Апо В встречается в двух формах - большей по размерам Апо В100 и Апо В48 , которая составляет 48% от молекулярной массы Апо В100. Все апопротеины являются гидрофобными соединения (плохо растворяются в воде). Вырабатываются печенью и частично тонким кишечником. В клинической лабораторной практике нашло применение определения уровня Апо А-1 и Апо-В белков.

Аполипротеин А-1 (Apolipoprotein A-1, Apo A1)- является основным белком липопротеинов высокой плотности (ЛПВП). Он участвует в транспорте триглицеридов и холестерина, активирует лицетин-холестерин-ацетилтрансферазу, способствуя обратному транспорту холестерина с периферии (в том числе из стенки сосудов) в печень.

У пациентов с атеросклеротическими изменениями наблюдаются пониженные уровни Apo A1 . Даже в случае, когда концентрация аполипопротеина В находится в пределах нормы, пониженные уровни Apo A1 в крови считаются фактором риска развития атеросклеротических процессов. Снижение уровня Apo A1 в крови наблюдается также при дислипопротеинемии, активной фазе цирроза печени, при лечении инсулином.

Маркёр риска атеросклероза.

Аполипопротеин В (Apolipoprotein B, Apo B) - основной структурный белок богатых триглицеридами атерогенных липопротеинов низкой плотности (ЛПНП). Благодаря наличию этого белка ЛПНП реагируют со специфическими рецепторами эндотелиальных, гладкомышечных и др. клеток. Apo B - главный транспортер триглицеридов из кишечника в жировые клетки. По данным исследований, аполипопротеин В является лучшим маркёром, по сравнению с определением липопротеинов низкой плотности при оценке риска атеросклероза коронарных сосудов.

Apo A1 и Apo B формируют мицеллярную структуру липопротеиновых комплексов, служат «ядром» липопротеиновых частиц и не покидают их в процессе трансформаций. Поэтому определение в крови Apo A1 и Apo B имеет большое значение для выявления факторов риска атеросклероза коронарных артерий, а соотношение Apo B/Apo A1 превосходит прогностическое значение определения отдельных аполипопротеинов. Чем больше в сыворотке крови Apo A1 и меньше Apo B , тем ниже вероятность развития сердечно-сосудистой патологии. В связи с этим в лабораторной диагностике предложен коэффициент соотношения Apo B/Apo A1 . В норме это соотношение превышает «1» и служит одним из надежных показателей атерогенного сдвига.

Показатель баланса атерогенных, Аполипопротеин В (Apo B) и антиатерогенных, Аполипопротеин А-1 (Apo A1) частиц - самый точный индикатор риска сердечно-сосудистых заболеваний у лиц с их бессимтомным течением и страдающих сахарным диабетом.

Показания к назначению анализа:

• Атеросклероз и связанные с ним заболевания сердечно-сосудистой системы: ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда (оценка риска, диагностика, прогнозирование).
• Болезни печени.
• Диагностика наследственных нарушений липидного обмена.

Когда уровень аполипопротеина В повышен?

Атеросклероз, болезни печени, беременность, гипер-апобеталипопротеинемия (нормальная концентрация липопротеинов высокой плотности и повышение аполипопротеина В), гипотиреоидизм, поражения коронарных артерий, инфаркт миокарда, сахарный диабет, нефротический синдром, хроническая почечная недостаточность, синдром Кушинга, семейная комбинированная гиперлипидемия, семейная гиперхолестеринемия, семейный дефект аполипопротеина В-100, полигенная (спорадическая) гиперхолестеринемия, стенокардия.

Когда уровень аполипопротеина В понижен?

Абета-липопротеинемия, гипо-беталипопротеинемия, гипертиреоидизм, декомпенсированный сахарный диабет, инфекции и воспаление, нарушения питания или всасывания питательных веществ в кишечнике, тяжелые ожоги, хроническая анемия.

Липопротеиновая тест система Дако включает детализированные рабочие методики для автоматизированных аппаратов и следующие реагенты, которые доступны раздельно:

Реагенты	Наименование	Кат.Номер

Реагенты	Наименование	Кат.Номер
Буфер для разведения
Реакционный буфер 1
Реакционный буфер 3
Реакционный буфер 4

Образцы:

Сыворотка или плазма. Для оценки липопротеина (a) мы рекомендуем свежую сыворотку или плазму пациентов взятую натощак.

Литература

1. Kampstrup PR , Benn M, Tybjærg-Hansen A, Nordestgaard BG. Extreme Lipoprotein (a) levels and risk of myocardial infarction in the general population. The Copenhagen City heart study. Circulation, 2008; 117: 176-184.
2. Walldius G, Jungner I. The apoB/apoA-1 ratio: a strong, new risk factor for cardiovascular disease and a target for lipid-lowering therapy - a review of the evidence. Journal of Internal Medicine 2006; 259 (5): 493-519.
3. Parish S, Peto R, Palmer A, Clarke R, Lewington R, Lewington S, Offer A, Whitlock G, Clark S, Youngman L, Sleight P, Collins R. The joint effects of apolipoprotein B, apolipoprotien A, LDL cholesterol and HDL cholesterol on risk: 3510 cases of acute myocardial infarction and 9805 controls. European Heart Journal Advance Access published online June 11, 2009.
4. Комаров Ф. И., Коровкин Б. Ф. Биохимические показатели в клинике внутренних болезней. - М.: Медпресс, 2000. - 228 с. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006, p. 1798. WALLDIUS G., JUNGNER I. J.Intern. Med., 2004, 255, 2.
5. Ватутин Н.Т., Ельский В.Н., Чупина В.А. Роль воспаления в атерогенезе // Журн. АМН Украины. - 2000. - № 6, Т. 3. - С. 520-533. Творогова М.Г., Васин П.Н., Рожкова Т.А., Кухарчук В.В., Титов В.Н. Липидный состав липопротеидов высокой плотности при наследственных гиперлипопротеинемиях. // Вопр. мед. химии - 1998. - том 44.- N5. С. 452- 459.
6. Титов В.Н. Биохимические факторы риска коронарного атеросклероза. // Кардиология.- 1991.-N 7.-С. 141 - 144.
7. Титов В.Н. Аполипопротеин (а) - маркер активности атеросклеротического процесса. // Тер. архив. - 1993. -N12.-С. 79-82.

apolipoprotein B, apoB ) - единственный аполипопротеин , носитель «плохого холестерина», вызывающего накопление холестерина в стенках кровеносных сосудов. АпоВ является также основным аполипопротеином хиломикрон , липопротеинов очень низкой плотности и их остатков. АпоВ является лигандом для ЛПНП-рецептора , что важно для деградации липопротеинов низкой плотности в печени . Однако, накопление апоВ в крови приводит к развитию атеросклероза . Концентрация апоВ в крови является даже более достоверным индикатором риска атеросклероза , чем общий холестерин или холестерин ЛПНП.

Структура и изоформы

В организме синтезируется две изоформы апоВ: апоВ-100 и апоВ-48. АпоВ-100 синтезируется в печени и соответствует полному 100% гену АПОВ. В кишечнике , однако, синтезируется изоформа, соответствующая лишь половине (точнее около 48% - отсюда и название) гена АПОВ - апоВ-48. АпоВ-100 - белок, состоящий из 4536 аминокислот с молекулярной массой 512 кДа и является одним из самых больших белков организма. АпоВ-48 примерно в 2 раза меньше. Обе изоформы апоВ очень гидрофобны и глубоко погружены в липидный слой липопротеина, не растворимы в воде и без липида не существуют. АпоВ-48 является компонентом липопротеинов кишечного происхождения - хиломикронов и остатков хиломикронов. Так как апоВ-48 не содержит участка, распознающегося ЛПНП-рецептором, эти частицы деградируют за счёт апоЕ , другого лиганда данного рецептора. АпоВ-100 - компонент липопротеинов печёночного происхождения - ЛПОНП , ЛППП и ЛПНП . АпоВ-100 определяет захват и последующую деградацию ЛПНП печенью.

Патология

Высокий уровень апоВ связан с сердечно-сосудистыми заболеваниями и атеросклерозом . При некоторых мутациях гена апоВ развивается умеренная гиперхолестеринемия с повышенным уровнем ЛПНП, однако без существенных нарушений.

Экспериментальная модель апоВ

Мыши , у которых экспрессия апоВ была повышена, характеризовались высоким уровнем «плохого холестерина» и низким уровнем «хорошего холестерина». Мыши с единственной копией гена апоВ показывали обратную картину и были устойчивы к гиперхолестеринемии.

Цена: 150 грн.

Срок выполнения, дней: 1

Код исследования: Р35

Туберкулез по сей день является наиболее частой причиной смерти от инфекционных заболеваний у взрослых. Он вызывается человеческим (M. tuberculosis) и бычьим (M. bovis) типом микобактерий. Отличительной особенностью этих бактерий является устойчивость их клеточной стенки к действию кислот, отчего их называют кислотоустойчивыми. Заражение Mycobacterium tuberculosis происходит, как правило, воздушно-капельным путем, а Mycobacterium bovis - алиментарным (через пищевые продукты, в том числе и молоко), возможно заражение контактным путем (через раневую поверхность) и внутриутробно (от больной туберкулезом матери к плоду).

При первичном инфицировании клинические симптомы, как правило, отсутствуют. По мере прогрессирования заболевания появляются усталость, ночная потливость и лихорадка, кашель с мокротой, теряется масса тела. Примерно в 10 % случаев наблюдается активная форма туберкулеза, риск развития которой наиболее высок при ослабленном иммунитете, в том числе при ВИЧ-инфекции, сахарном диабете, терминальной почечной недостаточности, злокачественных опухолях и т. д.

Подготовка пациента: Желательно взятие материала проводить до диагностических и лечебных манипуляций в предполагаемом месте локализации возбудителя. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии.

Материал: Мокрота.

Стабильность пробы: В течение 2-х недель при t 6-8ºC.

Метод : ПЦР качественный анализ.

Анализатор: RotorGene.

Тест - система: АмплиСенс.

Референсные значения (норма): Не обнаружено.

Основные показания к назначению анализа:
1. Бронхиты, бронхопневмонии сопровождающиеся резким увеличением прикорневых лимфатических узлов;
2. Кровохарканье на фоне общего астенического состояния;
3. Острые воспаления верхних и нижних дыхательных путей, сопровождающиеся продуктивным кашлем при наличии длительного контакта с больным туберкулёзом в анамнезе

Интерпретация результатов:

Положительный результат:
1. В анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для микобактерий .

Отрицательный результат:

1. В анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для микобактерий или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности теста.

Аполипопротеин В это белок, который входит в состав липопротеидов низкой плотности. Именно эти липопротеиды представляют главную опасность с точки зрения развития атеросклероза. Аполипопротеин В принято разделять на два вида - аполипопротеин В-48 синтезируется кишечником, а аполипопротеин В-100 продуцируется печенью. При помощи этого белка сначала образуются липопротеиды очень низкой плотности, а затем, уже на их основе появляются липопротеиды низкой плотности, которые и являются разносчиками по организму «вредного» холестерина.

Холестерин – это вещество, которое необходимо человеческому организму для построения клеточных мембран и нормального протекания обменных процессов. Беда в том, что тот холестерин, который находится в составе липопротеидов низкой плотности или, как их часто называют – ЛПНП, оседает на стенках сосудов, образуя атеросклеротические бляшки. В результате этого резко возрастает опасность различных сердечно-сосудистых заболеваний, в том числе, инфарктов и инсультов.

Норма Аполипопротеина В в крови. Расшифровка результата (таблица)

Уровень содержания аполипопротеина В в крови человека является значительно более информативным показателем, чем даже содержание самих липопротеидов низкой плотности. Тест на аполипопротеин В назначается в случае, если необходимо оценить опасность возникновения атеросклероза а также других сердечно-сосудистых заболеваний. Этот анализ крови назначается также в случае, если среди близких родственников пациента имеются случаи инфарктов или инсультов в раннем возрасте, а также для оценки эффективности лечения и профилактики понижающими уровень холестерина препаратами – статинами. Риск возникновения и развития подобных заболеваний возрастает в случае стойкого повышения артериального давления, у пожилых людей – у мужчин после 45 дет, при избыточной массе тела или при сахарном диабете.

В группу риска также входят люди, злоупотребляющие курением и крепкими алкогольными напитками ил ведущие малоподвижный образ жизни.

Норма Аполипопротеина В в крови обычных людей и беременных женщин:

Обратите внимание на то, что во время беременности норма содержания аполипопротеина В увеличивается от триместра к триместру, хотя в первые месяцы беременности она может быть несколько ниже обычной. Это абсолютно нормально и не является патологией.

Если аполипопротеин В повышен, что это значит?

Если норма Аполипопротеина В в крови повышена, это означает, что в крови пациента присутствует большое количество липопротеидов низкой плотности, переносящих по организму и сосудам «вредный» холестерин. Соответственно, это свидетельствует о повышенном риске сердечно-сосудистых заболеваний. Такое явление может иметь наследственный характер, например - полигенная (спорадическая) гиперхолестеринемия. Но оно же может оказаться и следствием некоторых заболеваний или проблем с внутренними органами, а именно:

• сахарный диабет 2 типа,
• снижение функции щитовидной железы = гипотериоз,
• застой желчи в желчном пузыре, который может быть вызван желчекаменной болезнью или воспалительными процессами в печени и желчном пузыре,
• гепатит или цирроз печени,
• нефротический синдром,
• хронические заболевания почек,
• синдром Кушинга.

Как уже было сказано выше, беременность приводит к повышению уровня аполипопротеина В, что совершенно нормально. Примерно через полтора месяца после рождения малыша он снова приходит в норму. К повышению уровня «вредного» холестерина в организме может привести прием анаболических стероидных препаратов, мочегонных средств, избыточная масса тела и недостаток движения, гиподинамия.

Если аполипопротеин В понижен, что это значит?

Со сниженным уровнем аполипопротеина В тоже не все хорошо, как это могло бы показаться. Конечно, при дефиците этого белка липопротеиды низкой плотности не могут образовываться, а, следовательно, уменьшается количество «вредного» холестерина и снижается риск развития атеросклероза. Тем не менее, подобное явление может быть признаком некоторых заболеваний, а именно:

• повышения функции щитовидной железы – гипертиреоза,
• протекающих в организме пациента острых воспалительных процессов инфекционного характера,
• нарушение работы кишечника,
• воспалительные заболевания суставов.

Дефицитное содержание аполипопротеина В в организме человека также может носить наследственный характер. Такой же эффект может вызвать и злоупотребление алкогольными напитками, когда печень просто перестает нормально работать. Поэтому каждый подобный случай нужно рассматривать в отдельности и устанавливать правильный диагноз на основании всей совокупности имеющихся факторов.