Основные группы крови по системе аво. Генетика группы крови и их полиморфизмы

Систему группы крови АВО составляют два групповых агглютиногена - А и В и два соответствующих агглютинина в плазме - альфа (анти-А) и бета (анти-В). Различные сочетания этих антигенов и антител образуют четыре группы крови: группа 0(1) - оба антигена отсутствуют; группа А(II) - на эритроцитах присутствует только антиген А; группа В(III) - на эритроцитах присутствует только антиген В; группа АВ (IV) - на эритроцитах присутствуют антигены А и В.

Уникальность системы АВО состоит в том, что в плазме у неиммунизированных людей имеются естественные антитела к отсутствующему на эритроцитах антигену: у лиц группы 0(1) - антитела к А и В; у лиц группы А(II) - анти-В-антитела; у лиц группы В(III) - анти-А-антитела; у лиц группы АВ(IV) нет антител к антигенам системы АВО.

В последующем тексте анти-А- и анти-В-антитела будут обозначаться как анти-А и анти-В.

Определение группы крови АВО проводят путем идентификации специфических антигенов и антител (двойная или перекрестная реакция). Анти-А и анти-В выявляют в сыворотке крови с помощью стандартных эритроцитов А(II) и В(III). Наличие или отсутствие на эритроцитах антигенов А и В устанавливают при помощи моноклональных или поликлональных антител (стандартных гемагглютинирующих сывороток) соответствующей специфичности.

Определение группы крови проводят дважды: первичное исследование - в лечебном отделении (бригаде заготовки крови); подтверждающее исследование - в лабораторном отделении. Алгоритм проведения иммуногематологических лабораторных исследований при переливании крови представлен на рис. 18.1.

Результат определения группы крови записывается в правом верхнем углу лицевого листа истории болезни или в донорский журнал (карту)с указанием даты и за подписью врача, производившего определение.

На северо-западе России распределение групп крови системы АВО в популяции следующее: группа 0(I) - 35%; группа А(II) - 35-40%; группа В(III) - 15-20%; группа АВ (IV) - 5-10%.

Следует отметить, что существуют различные виды (слабые варианты) как антигена А (в большей степени), так и антигена В. Наиболее часто встречаются виды антигена А - А1 и А2. Распространенность антигена А1 у лиц групп А(II) и АВ(IV) составляет 80%, а антигена А2 - около 20%. Образцы крови с А2 могут содержать анти-А1-антитела , взаимодействующие со стандартными эритроцитами группы А(II). Наличие анти-А1 выявляется при перекрестном определении групп крови и при проведении пробы на индивидуальную совместимость.

Для дифференцированного определения вариантов антигена А (А1 и А2) необходимо использовать специфические реагенты (фитогемагглютинины или моноклональные антитела анти-А1. Пациентам групп А2(II) и А2В(IV) нужно переливать эритроцитосодержащие гемокомпоненты, соответственно, групп А2(II) и А2В(IV). Также могут быть рекомендованы трансфузии отмытых эритроцитов: 0(I) - пациентам с группой крови А2(II); 0(I) и В(III) - пациентам с группой крови А2В(II).

Определение групповой принадлежности крови по системе АВО

Группы крови определяют по стандартным сывороткам (простая реакция) и стандартным эритроцитам (двойная или перекрестная реакция).

Группу крови простой реакцией определяют обязательно двумя сериями стандартных изогемагглютинирующих сывороток.

Ход определения . Определение группы крови производят при хорошем освещении и температуре от + 15 до + 25°С на планшетах. На левой стороне планшета надписывают 0(1), в середине - А(II), на правой стороне - В(III). В середине верхнего края планшета отмечают фамилию донора или номер исследуемой крови. Используют активные стандартные сыворотки трех групп (О, А, В) с титром не ниже 1:32, двух серий. Сыворотки располагают в специальных штативах в два ряда. Каждой сыворотке соответствует маркированная пипетка. Для дополнительного контроля используют сыворотку группы АВ(IV).

На планшет наносят по одной - две капли стандартных сывороток в два ряда: сыворотку группы 0(1) - слева, сыворотку группы А(II) - в середину, сыворотку группы В(III) - справа.

Капли крови из пальца или пробирки наносят пипеткой или стеклянной палочкой около каждой капли сыворотки и смешивают палочкой. Количество крови должно быть в 8-10 раз меньше, чем сыворотки. После смешивания тарелку или планшет осторожно покачивают в руках, что способствует более быстрой и четкой агглютинации эритроцитов. По мере наступления агглютинации, но не ранее чем через 3 мин, к каплям сыворотки с эритроцитами, где наступила агглютинация, добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия и продолжают наблюдение до истечения 5 мин. Через 5 мин читают реакцию в проходящем свете.

Если агглютинация нечеткая, к смеси сыворотки и крови дополнительно добавляют по одной капле 0,9% раствора хлорида натрия, после чего дают заключение о групповой принадлежности

Результаты реакции

1. Отсутствие агглютинации во всех трех каплях указывает на то, что в исследуемой крови нет агглютиногена, то есть кровь относится к группе 0(I).

2. Наступление агглютинации в каплях с сыворотками 0(I) и В(III) указывает на то, что в крови имеется аггглютиноген А, то есть кровь относится к группе А(II).

3. Наличие агглютинации в каплях с сыворотками группы 0(I) и А(II) указывает на то, что в исследуемой крови имеется агглютиноген В, то есть кровь группы В(III).

4. Агглютинация во всех трех каплях указывает на наличие в исследуемой крови агглютиногенов А и В, то есть кровь относится к группе АВ(IV). Однако в этом случае, учитывая, что агглютинация со всеми сыворотками возможна за счет неспецифической реакции, необходимо нанести на планшет или тарелку две-три капли стандартной сыворотки группы АВ(IV) и добавить к ним 1 каплю исследуемой крови. Сыворотку и кровь перемешивают и результат реакции наблюдают в течение 5 мин.

Если агглютинация не наступила, то исследуемую кровь относят к группе АВ(IV). Если же агглютинация появляется с сывороткой группы АВ(IV), значит, реакция неспецифическая. При слабой агглютинации и во всех сомнительных случаях кровь заново проверяют со стандартными сыворотками других серий.

15.Резус-фактор крови. Резус-фактор (Rh-фактор) - это белок крови, который содержится на поверхности клеток крови - эритроцитов. Если этот белок есть, то это означает, что у человека положительный резус-фактор, если же его нет - то отрицательный. Резус фактор определяется по антигену.

Резус-фактор находят в эритроцитах, а также в лейкоцитах, тромбоцитах, в разных органах и тканевых жидкостях, околоплодных водах. Если кровь с положительным резус-фактором попадает человеку с резус-отрицательной кровью (Rh-фактор отсутствует), то образуются специфические антитела - антирезус агглютинины; они могут образоваться у резус-отрицательной беременной от резус-положительного плода. В связи с этим может погибнуть ребенок или резус-отрицательный человек, если ему повторно переливают резус-положительную кровь. У резус-отрицательных женщин при беременности резус-положительным плодом может быть фатальным и первое переливание крови.

В последние годы доказано, что распределение людей на резус-положительных (примерно 85%) и резус-отрицательных (примерно 15%) весьма условно. Практическое значение при переливании крови имеют 6 антигенов системы Rh-Hr (D, С, Е, d, с, е). Первые три антигена являются разновидностями резус-фактора - D(Rh0), С(rh′), Е(rh″). Наиболее антигенен и является наиболее частой причиной изосерологических конфликтов при гемотрансфузиях и беременности антиген D(Rh0), наиболее слаб - Е(rh″). Поэтому при переливании крови необходимо предупредить введение антигена D(Rh0) с кровью донора реципиентам, этот антиген не имеющим. С этой точки зрения резус-принадлежность у реципиентов определяют по наличию антигена D(Rh0), а другие антигены системы Rh-Hr не учитываются.

Если у доноров определять резус-принадлежность по тому же принципу, что и у реципиентов, то оказывается, что в 2-3% случаев резус-отрицательная донорская кровь содержит в эритроцитах антигены С(rh′) и Е(rh″). В связи с этим к группе доноров с резус-отрицательной кровью должны относиться только лица, в эритроцитах которых нет антигенов D(Rh0), С(rh′) и Е(rh″). Это обстоятельство имеет существенное значение, так как лицо, в эритроцитах которого обнаружены антигены С(rh′) или Е(rh″), будучи донором, относится к группе резус-положительной, но, будучи реципиентом, должно считаться резус-отрицательным, ибо отсутствует антиген 0.

Таким образом в крови индивидуума может быть один тип резус-фактора или комбинация из нескольких типов, причем каждый из типов резус-фактора вызывает образование специфических антител.

В эритроцитах есть также антигены системы Hr-Hr0, rh′, rh″, которые вызывают образование специфических антител, однако их антигенные свойства слабее, чем у резус-фактора. Наиболее частой причиной иммунизации оказывается антиген rh′(с), наименее антигенны rh″(е) и Hr0(d). Все лица с резус-отрицательной кровью одновременно являются Hr-положительными, если имеют антиген rh′(с). Наличие антигена Нr заставляет предостеречь от трансфузий резус-отрицательной крови реципиентам с резус-положительной кровью или вообще без определения резус-принадлежности больного, так как можно вызвать иммунизацию или посттрансфузионное осложнение по антигену rh′(с), если больной окажется Hr-отрицательным.

По современным представлениям (Fischer, Rасе), резус-система, по сути, комплекс шести антигенов Rh-Hr систем, связанных в одной паре хромосом. У человека могут быть антигены обеих систем (Rh и Hr) или только одной системы (Rh или Hr), но нет таких людей, у которых не было бы одной из этих двух антигенных систем. В настоящее время известны 27 комбинаций типов антигенов.

Перед переливанием крови обязательно следует установить резус-принадлежность донора и реципиента и провести пробу на резус-совместимость. При переливании крови следует строго придерживаться принципа использования крови, одноименной по резус-фактору.

Около 80 % людей имеют I и II группы крови, 15 % - III и 5 % - IV группу крови. Отдавать свою кровь для переливания, т. е. быть донором, может каждый здоровый человек. Донорство приносит пользу не только больным, которым переливание крови иногда спасает жизнь, но и самому донору. Взятие небольшого количества крови у человека (200-250 мл) усиливает деятельность кроветворных органов.

Понятие «группы крови появилось впервые именно по отношению к эритроцитарной антигенной системе АВО. В 1901 году Карл Ландштейнер, смешивая эритроциты с сыворотками крови разных людей, обнаружил процесс склеивания эритроцитов (агглютинацию), причем происходил он лишь при определенных сочетаниях сыворотки и эритроцитов. Сейчас всем известно, что существует 4 группы крови. На каком же основании кровь всех людей планеты можно разделить всего на 4 группы. Оказывается по наличию или отсутствию в мембране эритроцитов всего двух антигенов – эти антигены Ландштейнер назвал антигенами А и В. Обнаружены 4 варианта присутствия этих антигенов на мембране эритроцитов.

ВариантI (внимание! Группы крови во всем мире обозначаются римскими цифрами) – мембрана эритроцитов не содержит ни антигена А, ни антигена В, такая кровь отнесена к группеI и обозначается О (I), вариант II – эритроциты содержат только антиген А – вторая группа А (II), вариант III – мембрана эритроцитов содержит только антиген В – третья группа B (III), мембрана эритроцитов людей с IV группой крови содержит оба антигена AB (IV). Примерно 45% жителей Европы имеют группу крови А, около 40% - О, 10% - В и 6% - АВ, а у 90% коренных жителей Северной Америки группа крови – 0, у 20% жителей центральной Азии группа крови В.

Почему же иногда происходит реакция агглютинации при смешивании эритроцитов одного человека с сывороткой другого, а иногда ее нет? Дело в том, что сыворотка крови содержит уже «готовые» антитела к антигенам А и В , эти антитела называются естественными. Специфичным к антигены А является антитело α – при контакте мембраны эритроцита содержащего антиген А и антитела α происходит склеивание эритроцитов – реакция агглютинации, то же наблюдается и при встрече антигена В с антителом β. Поэтому антителаα и β назвали агглютининами. Отсюда понятно, что кровь, содержащая одновременно антиген А и антитело α н е может существовать, так же как В и β. В крови одного и того же человека не может быть одноименных агглютиногенов и агглютининов.

Агглютинины распределены в соответствии с антигенами следующим образом:

Как видим, в норме никакой агглютинации быть не может, а вот если кровь второй группы смешать с кровью третьей, то антиген А, встретившись с антителом α вызовет реакцию антиген-антитело и приведет к агглютинации эритроцитов, хорошо, если это произойдет в пробирке, т.к. в сосудах склеивание эритроцитов приведет к их массовой гибели, закупорит капилляры, вызовет внутрисосудистое свертывание крови – такая ситуация называется гемотрансфузионный шок и может закончиться гибелью реципиента. Вот почему так важно уметь определить группу крови по системе АВО. Для того чтобы определить группу крови по этой системе нужно просто обнаружить (или не обнаружить) один из двух антигенов, или оба вместе. Поскольку природа уже приготовила специфичные для этих антигенов антитела, сделать это не составляет труда, т.к. реакция агглютинации - надежный признак того, что произошла встреча одноименных антигена и антитела.

ГРУППЫ КРОВИ СИСТЕМЫ РЕЗУС

Антигены системы резус: 6 аллелей 3 генов системы Rh кодируют Аг: c, C, d, D, e, E. Они находятся в сочетаниях, например, CDE/cdE. Всего возможно 36 комбинаций.

Rh-положительная и Rh-отрицательная кровь:

Если генотип конкретного человека кодирует хотя бы один из Аг C, D и E, кровь такого человека будет резус–положительной.. Резус–отрицательны только лица фенотипа cde/cde (rr).

Итак - если мембрана эритроцитов человека содержит один из антигенов системы резус, то его кровь считается резус-положительной (на практике резус-положительными считают лиц, имеющих на поверхности эритроцитов Аг D - сильный иммуноген).

Общая информация об исследовании

Группа крови АВO – это система, отражающая наличие или отсутствие антигенов на поверхности эритроцитов и антител в плазме крови. ABO (читается как "а-бэ-ноль") является самой распространенной системой групп крови в России.

Эритроциты на своей поверхности несут сигнальные молекулы – антигены - агглютиногены. Двумя основными антигенами, встроенными в молекулу эритроцитов, являются А и В. Группы крови определяются на основании наличия или отсутствия этих антигенов. Кровь людей, у которых на эритроцитах присутствует антиген А, относится к второй группе – A (II), кровь тех, у кого на эритроцитах – антиген В, относится к третьей группе – B (III). Если на эритроцитах присутствуют и антигены А, и антигены В – это четвертая группа – AB (IV). Бывает и так, что в крови на эритроцитах не определяется ни одного из этих антигенов – тогда это первая группа – O (I).

В норме организм вырабатывает антитела против тех антигенов (А или В), которых нет на эритроцитах – это агглютинины находящиеся в плазме крови. То есть у лиц со второй группой крови – А(II) – на эритроцитах присутствуют антигены A, а в плазме будут содержаться антитела к антигенам В – обозначаются как анти-B (бета-агглютинин). Так как одноименные антигены (агглютиногены) на поверхности эритроцитов и агглютинины в плазме (A и альфа, B и бета) вступают друг с другом в реакцию и приводят к "склеиванию" эритроцитов, они не могут содержаться в крови у одного человека.

Открытие групповой системы ABO позволило понять, почему переливание крови иногда происходило удачно, а иногда вызывало тяжелые осложнения. Было сформулировано понятие совместимости групп крови. Например, если человеку со второй группой крови – А(II), которая содержит антитела к антигену В, перелить третью группу крови – B (III), произойдет реакция между антигенами и антителами, которая приведет к склеиванию и разрушению эритроцитов и может иметь тяжелые последствия вплоть до летального исхода. Поэтому группы крови при переливании обязательно должны быть совместимы.

Группа крови определяется по наличию или отсутствию склеивания эритроцитов с использованием сывороток, содержащих стандартные антигены и антитела.

В центрах переливания крови на пакетах с кровью или с ее компонентами, полученными от доноров, помечается "O (I)", "A (II)", "B (III)" или "AB (IV)", что позволяет быстро найти кровь нужной группы, когда она требуется.

Для чего используется исследование?

Чтобы узнать, какую кровь можно безопасно переливать пациенту. Крайне важно убедиться, что донорская кровь совместима с кровью реципиента – человека, которому ее собираются переливать. Если в донорской крови или ее компонентах есть антитела к антигенам, содержащимся на эритроцитах реципиента, то может развиться тяжелая трансфузионная реакция, вызванная разрушением эритроцитов в сосудистом русле.

Когда назначается исследование?

• Перед переливанием крови – как тем, кому оно требуется, так и донорам.

Переливание крови и ее компонентов чаще всего требуется в следующих ситуациях:

• • тяжелая анемия,
  • кровотечение, возникшее во время или после операции,
  • тяжелые травмы,
  • массивная кровопотеря любого происхождения,
  • онкологические заболевания и побочные эффекты химиотерапии,
  • нарушения свертываемости крови, в частности гемофилия.
• Перед хирургическим вмешательством.

И по группам крови MN. Чаще всего вопросы очень простые, ответить на них можно «в одно действие».

Но почему же они возникают?

Дело в том, что в сознании большинства людей по крайней мере две характеристики: 1) группы крови человека по системе АВО и 2) резус-фактор — слиты воедино (вообще-то биохимических характеристик крови человека ученые обнаружили еще около 30, но они не являются важными при переливании крови).

Из следующих иллюстраций видно, что резус-фактор — это совершенно отдельная от групп крови по системе АВО характеристика.

Так вот, если у родителей или судмедэкспертов встает вопрос, может ли быть тот или иной ребенок с такими-то характеристиками группы крови по системе АВО и резус-фактору, быть родным, удобнее рассматривать эти два показателя совершенно раздельно.

При беременности, например, если группы крови матери и плода по системе АВО вовсе не следует учитывать, то разные резус-факторы могут сказаться на здоровье плода.

Однако в этой статье приводятся вопросы читателей и мои ответы на них в том виде как они были представлены в комментариях.

1. Скажите, если у меня I+, а у мужа II+, может ли наша дочь иметь II-?

Да, может быть. Если по резус-фактору оба родителя гетерозиготны Rr, то может родиться ребенок резус-отрицательный с генотипом rr. А по группам крови может быть ребенок с I или со II группой, так как Ваш генотип ОО, а у мужа АО или АА и у вас могут быть дети ОО, либо АО.

2. Скажите, если у матери 4-, а у отца 3+, может у них родиться ребёнок со 2-?

Да, может быть. Например, если генотип матери ABrr, отца BORr, то возможно рождение ребенка с генотипом AOrr.

3. У мужа третья отрицательная группа крови, у его мамы первая положительная, у папы вторая положительная. Разве такое возможно?

По резус-фактору такое возможно. Значит оба родителя вашего мужа по резус-фактору гетерозиготны Rr и Rr. А вот от родителей с первой группой крови (генотип OO) и со второй группой крови (генотип AA или AO) в норме не может родиться ребенок с третьей группой крови (с генотипом BB или BO). Пишу «в норме», то есть в отсутствие бомбейского феномена.

4. Какую кровь унаследуют дети, если отец имеет резус-положительную кровь II группы, а мать резус-отрицательную IV группы?

Генотип матери мы можем сразу записать однозначно. Он будет таким АВrr. А генотип отца может иметь 4 варианта записи, поэтому в этой задаче будет 4-ре варианта решения.
1) P: ABrr x AARR. G: матери Ar, Br и отца AR. F: AARr, ABRr (все дети с резус-положительной кровью со 2-й или 4-й группами крови).
2) P: ABrr x AORR. G: матери Ar, Br и отца AR, OR. F: AARr, AORr, ABRr, BORr (все дети с резус-положительной кровью со 2-й, 4-й или 3-й группами крови).
3) P: ABrr x AARr. G: матери Ar, Br и отца AR, Ar. F: AARr, AArr, ABRr, ABRrr (резус-положительные со 2-й группой, резус-отрицательные со 2-й группой, резус-положительные с 4-й группой, резус-отрицательные с 4-й группой).
4) P: ABrr x AORr. G: матери Ar, Br и отца AR, Ar, OR, Or. F: AARr, AArr, ABRr, ABRrr (резус-положительные со 2-й группой, резус-отрицательные со 2-й группой, резус-положительные с 4-й группой, резус-отрицательные с 4-й группой, резус-положительные с 3-й группой, резус-отрицательные с 3-й группой).

5. Если у папы 1 положительная а у мамы 4 положительная у ребенка может быть 4 положительная?

По резусу противоречий нет. А вот по группам крови у данных родителей не может родиться ребенок с 4-й группой крови, так как отец с 1-й группой имеет генотип ОО, мать с 4-й группой имеет генотип АВ и их ребенок поэтому может быть АО (2-я группа) или ВО (3-я группа). Но следует знать, что в Индии был обнаружен

так называемый Бомбейский феномен .

Он обнаружен только у определенной популяции людей (кто знает, может быть он существует где-нибудь в мире и еще).

Суть феномена в том, что за группу крови по системе АВО отвечают не только сами аллели генов (О, А, В, от которых группа крови и зависит), а еще и ген h (проявляющийся в рецессивном состоянии).

Поэтому, можно предположить, если у отца с 1-й группой крови (установленной по биохимическому анализу) фактически имеются аллели А и В, но не проявившие себя из-за эпистаза, то ребенок может иметь 4-ю группу крови.

6. У меня кровь 2 группы, у жены 1 группа. Родился сын с 4 группой.Может ли быть такое?

Нет, теоретически такого быть не может. Но исключения бывают (Бомбейский феномен тому пример).

7. Определите вероятность рождения ребенка со 2 группой крови, если родители имеют 4 группу крови?

У родителей с 4-й группой крови генотип может быть только АВ. Всевозможные генотипы потомков АА, 2АВ, ВВ. Значит, вероятность рождения ребенка со второй группой крови (генотип АА) равна 25%.

8. Женщина со II группой крови и резус — отрицательная, причем по группе крови она гомозиготна, выходит замуж за мужчину с III группой крови и резус — положительного, гетерозиготного по обоим признакам.
Определите генотипы и фенотипы возможных детей.

P: ААrr.. *… BORr
G: ..Ar…..BR,Br,OR,Or
F: ABRr,ABrr,AORr,AOrr (с четвертой группой резус-положительные и резус-отрицательные, со второй группой резус-положительные и резус-отрицательные).

9. В судебной экспертизе определение группы крови используется для исключения отцовства. Можно ли исключить отцовство в случае, если мужчина имеет III группу крови, а ребенок и его мать II группу? Возможно ли исключение отцовства, если группа крови у мужчины I, II и IV?

Да, в первом случае, когда у мужчины III группа крови, его отцовство можно исключить (его генотип ВВ или ВО, генотип женщины АА или АО. Поэтому ребенок с генотипом АА или АО точно не от него). У этого ребенка может быть отец с группами крови I (генотип ОО), II (генотип АА или АО) или IV (генотип АВ).

10. В родильном доме в одну и ту же ночь родилось четыре младенца, обладавшие, как впоследствии было установлено, группами крови О, А, В и АВ. Группы крови четырех родительских пар были: 1) О и О; 2) АВ и О; 3) А и В; 4) В и В. Четырех младенцев можно с полной достоверностью распределить по родительским парам. Как это сделать?

Запишем генотипы родителей этих 4-х несчастных (перепутанных) младенцев: 1) ОО и ОО; 2) АВ и ОО; 3) АА или АО и ВВ или ВО; 4) ВВ или ВО и ВВ или ВО. Генотипы младенцев: 1) ОО; 2) АА или АО; 3) ВВ или ВО; 4) АВ.

Видим, что первый младенец мог родиться у любой пары (кроме пары 2) и его генотип нам пока мало, что может прояснить.

Второй младенец мог родиться и у пары 2), и у пары 3), но так как четвертый младенец мог родиться только от пары 3), то второй точно от пары 2).

Третьему младенцу из оставшихся пар родителей подходит только пара 4). Поэтому родителями первого младенца будет пара 1).
Далеко не всегда по группам крови можно установить родство. Пусть хоть сто младенцев родится в одну ночь, путать никого нельзя!

11. У моих родителей отец: 2+, мать 4+, родилась я со 2- группой крови, возможно ли такое? У меня ещё есть брат и сестра родные, у брата 4+, у сестры 2+. И я вышла замуж за человека с 3- группой крови, с какой группой крови у нас родится малыш?

Да у родителей с резус + кровью может родиться ребенок с резус — кровью, если они оба гетерозиготны по резус-фактору (то есть, их генотипы по резус-фактору Rr и Rr).

По системе АВО Ваш отец имеет генотип АО или АА, а мама однозначно АВ. Генотип Вашей группы по системе АВО и по резус-фактору ААrr или AOrr. Ваш брат имеет генотип ABRr или ABRR, сестра — AARr (или AARR, AORr, AORR). Ваш муж имеет генотип BBrr или BOrr. Ваш малыш может быть любым по группам крови (так как его генотип может быть OO, AO, BO, AB), но только резус — , то есть rr.

12. Мужчина и женщина, вступившие в брак, имеют следующие генотипы: у мужа — RrBB, у жены — rrAO. Какова вероятность рождения резус-положительного ребенка с IV группой крови?

В этой задаче нет ни одного момента из-за которого решение её могло бы вызвать затруднение. Не только родительские фенотипы указываются, но и расписаны сами генотипы.
P: ddАО x DdBB
G: dA,dO..DB,dB
F1: DdAB,DdBO,ddAB,ddBO, таким образом мы видим, что их четырех возможных генотипов потомства вероятность рождения детей DdAB (резус-положительных с IV группой крови) равна 25%.

13. Резус-положительная женщина со второй группой крови, отец которой имел резус отрицательную кровь первой группы, вышла замуж за резус-отрицательного мужчину с первой группой крови. Какова вероятность, что ребёнок унаследует оба признака отца?

Резус-положительная женщина со второй группой крови обязательно имеет аллели R-большое и А. Так как её отец был по генотипу rr, а по группе крови его генотип мог быть только 00, значит вторые аллели обоих признаков у женщины были рецессивными и её генотип был RrA0. Генотип мужчины мог быть только rr00.
P: ….RrA0….x.. rr00
G: RA,R0,rA,r0……r0
F1: RrA0,Rr00,rrA0,rr00 — как видим вероятность рождения ребенка с генотипом отца rr00 равна 25%.

14. Если у мамы первая группа крови, а у папы третья, ребёнок со второй может родиться?

Нет не может.
P: 00 x BB (или B0)
G: 0…..B (или B и 0)
F: B0 (или еще и 00). То есть могут быть дети только с 3-ей группой или с 1-ой.

15. Генотип женщины — RrBB, мужа — RrA0. Какова вероятность рождения резус-положительного ребенка с IV группой крови?

P: RrBB…x…..RrA0
G: RB,rB……RA,R0,rA,r0
F: RRAB,RRB0,RrAB,RrB0, RrAB,RrB0,rrAB,rrB0. Как мы видим в этом браке возможно рождение детей с 8-ю разными генотипами. Вероятность рождения резус-положительного ребенка с IV группой крови (то есть с генотипом RRAB или RrAB) равна 3/8 или 37,5%.

16. У мальчика 1 группа крови, у его сестры 4. Определите группы крови их родителей (Р).

Генотип мальчика с 1-й группой крови ОО, генотип его сестры с 4-й группой крови АВ. У родителей 2-я АО и 3-я ВО группы крови.

17. Родители имеют 3-ю группу крови, резус-фактор +. В потомстве есть ребенок с 1-ой группой крови, резус-фактор -. Какими еще могут быть дети в этом браке?

Сначала запишем генотипы родителей не полностью, а, исходя из их фенотипов, впишем лишь известные, аллели. (Вместо вторых аллелей ставим временно «-» радикал). Итак, имеем группу крови родителей В-, резус-фактор R-. Из условия задачи нам полностью известен генотип одного из детей OOrr. Значит оба родителя могли быть только дигетерозиготными BORr.
P: …BORr……. x…… BORr
G: BR,Br,OR,Or…..BR,Br,OR,Or, далее строим решетку Пеннета 4х4 и получим 9 B-R- : 3 B-rr: 3 OOR- : 1 OOrr. Значит в этом браке могут быть еще дети с 3-ей группой резус положительные, с 3-ей группой резус отрицательные и с 1-ой группой резус положительные.

18. У моего мужа группа крови В+ у меня А+. А у дочки О+.Возможно такое?

Конечно, возможно, если вы оба гетерозиготны по группе крови. Генотип мужа только ВО и ваш генотип обязательно АО.

19. Резус положительный мужчина со второй группой крови женился на резус положительной с третьей группой крови. Найти F1, если женщина и мужчина гетерозиготные по обеим парам признаков .

P: AORr…. *…. BORr
G: AR,Ar,OR,Or…..BR,Br,OR,Or, далее надо построить решетку Пеннета 4х4.

Вы увидите, что 16 вероятных генотипов потомства (что для людей совершенно невероятно и поэтому нет вообще ничего глупее, чем составлять и, тем более, решать такого типа задания) будут представлены такими 8-ю фенотипическими классами: 3 ABR-, 3 OOR-, 3 AOR-, 3BOR-, 1 ABrr, 1 AOrr, 1 BOrr, 1 OOrr.

То есть, если бы у этих родителей родилось 7-8 тысяч детей (а именно столько Мендель использовал для получения достоверных данных), тогда 3/16 потомства имели бы четвертую резус положительную группу крови, 3/16 потомства имели бы первую резус положительную группу крови, 3/16 потомства имели бы вторую резус положительную группу крови, 3/16 потомства имели бы третью резус положительную группу крови, 1/16 потомства имели бы четвертую резус отрицательную группу крови, 1/16 потомства имели бы вторую резус отрицательную группу крови, 1/16 потомства имели бы третью резус отрицательную группу крови, 1/16 потомства имели бы первую резус отрицательную группу крови.

20. Определите все возможные генотипы и фенотипы детей, если у мужчины 4-я группа крови и отрицательный резус-фактор, а у его матери резус-положительный, а у женщины 2-я группа крови и положительный резус-фактор, у её матери отрицательный резус-фактор

Итак, генотип мужчины ABrr (мать его очевидно была гетерозиготна по резус-фактору, то есть Rr, так как у сына один из аллелей r достался от нее. Но это совершенно ненужная информация для решения этой задачи). Генотип женщины АА(или АО)Rr (хотя она и положительная по резус-фактору, но гетерозигота, так как у ее матери кровь была резус-отрицательной rr).
1. P: ABrr * AARr
G: Ar, Br….AR,Ar
F: AARr, AArr, ABRr, ABrr (вторая положительная, вторая отрицательная, четвертая положительная, четвертая отрицательная)
2. P: ABrr * AORr
G: Ar,Br…AR,Ar,OR,Or
F: AARr,AArr,AORr,AOrr, ABRr,ABrr,BORr,BOrr (вторая положительная, вторая отрицательная, четвертая положительная. четвертая отрицательная, третья положительная, третья отрицательная).

21. Резус-положительная женщина с кровью II группы, отец которой имеет резус-отрицательную кровь I группы, вышла замуж за резус-отрицательного мужчину с I группой крови. Какова вероятность того, что ребенок унаследует оба признака отца? Какие группы крови можно будет переливать этим детям?

Обозначим: R — резус положительная кровь, r — резус отрицательная. I группа ОО, II группа АО или АА.
Генотип резус-положительной женщины со второй группой крови был R-А-. Так как ее отец был с генотипом rrОО, то генотип этой женщины был дигетерозиготным RrAO.
P: RrAO…. *…. rrOO
G: RA,RO,rA,ro…..rO
F: RrAO, rrAO, RrOO, rrOO. Вероятность рождения ребенка с генотипом rrOO как у отца равна 25%. Их детям RrOO и rrOO можно переливать только I группу крови, а детям RrAO и rrAO — I или II группы крови.

22. В родильном доме возникло подозрение, что перепутали детей. Денис со II группой крови попал к родителям с IV и III группами крови, а Витя с III группой крови — к родителям со II и III группами крови. Произошла ли подмена детей, какова ее вероятность?

От родителей с IV и III группами крови, то есть с генотипами АВ и ВВ(ВО) дети могут иметь следующие группы крови: АВ, ВВ, АО, ВО. А у родителей с группами крови II и III, то есть с генотипами АА(АО) и ВВ(ВО) дети могут иметь такие группы крови: АВ,АО,ВО,ОО. Поскольку у Дениса II группа крови, то его генотип может быть АА или АО и его родителями могла быть любая пара с равной вероятностью. У Вити III группа крови, а значит его генотип ВВ или ВО и его родителями тоже могла быть любая пара. Таким образом, с вероятностью 50% можно утверждать, что подмены не было или подмена была.

23. Резус-отрицательная женщина (фенотип rh-) (оба ее родителя имели положительный резус-фактор). вступила в брак с резус-положительным мужчиной (фенотип Rh+). Дети с каким резус-фактором могут появиться от этого брака? Определите генотипы мужа, жены, ее родителей и возможных детей.

Так как генотип резус-отрицательной женщины был rr, то генотипы ее резус-положительных родителей могли быть только гетерозиготными Rr. Генотип ее резус-положительного мужа мог быть как RR, так и Rr, поэтому для нахождения генотипов их потомства надо рассмотреть оба возможных варианта:
а) P: rr * RR
G:…..r….R
F1: Rr — все дети резус-положительные.
б) P: rr * Rr
G:…..r…R,r
F1 Rr, rr — 50% детей резус-положительные, 50% — резус-отрицательные.

24. У братьев IV (AB) группа крови. Каковы группы крови возможны у их родителей?

Генотипы родителей по группам крови могли быть: АВ и ВО, АО и АВ и даже АО и ВО. Такое сочетание генотипов родителей ведь тоже позволяет появиться у них потомкам с генотипами АВ.

Есть также и другие вещества группы крови в эритроцитах,

которые контролируются различными генами. Они наследуются независимо от генов А, В, и 0 или резус-фактора. Например, ген,

контролирующий так называемые М и N группы крови.

Один аллель этого гена приводит к формированию М группы крови, другой — к N. Ни один из них не является доминантным по отношению к другому. Они по отношению друг к другу (как и аллели А и В по системе АВО).

Если имеется два аллеля гена М, то у человека группа крови называется М. Если имеется два аллеля гена N, то у человека группа крови называется N. Если генотип человека имеет и аллель М, и аллель N, то у этого человека MN группа крови (группы крови М и N не существенны при переливании крови).

Группы крови М и N не имеют никакой связи с группами крови А, В, и 0. Человек может иметь группу крови М, N или MN, независимо от того, имеет ли он также группу крови А, В, 0 или АВ.

25. Перед судебно-медицинской экспертизой поставлена задача выяснить, является ли мальчик, имеющийся в семье супругов Р, родным или приемным. Исследование крови мужа, жены и ребенка показало: жена — Rh-, АВ (IV) группа крови с антигеном М, муж — Rh-,0(I) группа крови с антигеном N, ребенок — Rh+, 0(I) группа крови с антигеном М. Какое заключение должен дать эксперт и на чем оно основано?

Ребенок в данной семье является приемным. Это ясно по группам крови родителей по системе АВО, по системе MN и по их резусу.

От групп крови с генотипами АВ и ОО могут быть дети только со второй АО или третьей ВО группами крови.

От родительских групп крови M и N ребенок может быть только гетерозиготным MN.

От резус-отрицательных родителей с генотипами rr x rr могут быть дети только резус-отрицательными rr.

26. Перед судебно-медицинским экспертом поставлена задача выяснить, является ли мальчик, живущий в семье супругов Р, родным или приемным сыном этих супругов. Исследование крови всех трех членов семьи дало следующие результаты. У матери группы крови Rh+, О и М; у отца — Rh-, АВ и N; у сына — Rh+, А и М. Какое заключение должен дать эксперт и как оно обосновывается?

Положительный резус-фактор мальчика не отрицает того, что он может быть сыном данных родителей (резусный белок он мог унаследовать от резус-положительной матери).

Наличие у него второй группы крови с генотипом АО тоже не противоречит его родству с родителями (ОО — у матери и АВ — у отца).

А вот по системе группы крови М, N, MN, мальчик не может быть сыном указанных родителей. У матери с генотипом ММ и отца с генотипом NN, ребенок должен был бы быть только с генотипом МN, а у этого мальчика генотип ММ. Вывод: мальчик не является родным сыном данных родителей.

27. Женщина с группами крови А и NN подает в суд на мужчину, как на виновника рождения ребенка с первой группой крови, NN. Мужчина имеет третью группу крови (В), ММ. Может ли этот мужчина быть отцом ребенка?

Исходя из условия задания, понятно, что претензии женщины к данному мужчине совершенно не правомочны. Да, по системе групп крови АВО, если они оба по своим группах крови гетерозиготны АО и ВО, то у них мог бы быть ребенок с 1 группой крови с генотипом ОО. Но по системе группы крови M, N, MN у неё от мужчины с генотипом ММ мог бы быть ребенок только с генотипом MN.

28. Дедушка мальчика со стороны матери имеет группу крови АВ, а остальные бабушки и дедушка имеют группу крови 0. Какова вероятность для данного мальчика иметь группу крови А, В, АВ и 0?

Мама мальчика может иметь группы крови с генотипами АО или ВО, а папа только ОО. Поэтому генотип мальчика АО и ОО или ВО и ОО, то есть вероятность иметь группу крови А = 25%, В = 25%, О — 50%, АВ — 0%.

*****************************************************************************

У кого будут вопросы по статье к репетитору биологии по Скайпу, обращайтесь в комментарии.

Группы крови системы АВ0

Группы крови системы АВ0 были открыты в 1900 году К.Ландштейнером, который смешивая эритроциты одних лиц с сывороткой крови других лиц, обнаружил, что при одних сочетаниях кровь свертывается, образуя хлопья (реакция агглютинации), а при других нет. На основании этих исследований Ландштейнер разделил кровь всех людей на три группы: А, В и С. В 1907 году была обнаружена еще одна группа крови.

Было установлено, что реакция агглютинации происходит при склеивании антигенов одной группы крови (их назвали агглютиногенами), которые находятся в красных кровяных тельцах - эритроцитах с антителами другой группы (их назвали агглютининам), находящимися в плазме - жидкой части крови. Разделение крови по системе АВ0 на четыре группы основано на том, что кровь может содержать или не содержать антигены (агглютиногены) А и В, а также антитела (агглютинины) α (альфа или анти-А) и β (бета или анти-Б).

Первая группа крови - 0 (I)

I группа - не содержит агглютиногенов (антигенов), но содержит агглютинины (антитела) α и β. Она обозначается 0 (I). Так как эта группа не содержит инородных частиц (антигенов), то ее можно переливать всем людям. Человек с такой группой крови является универсальным донором.

Вторая группа крови А β (II)

II группа содержит агглютиноген (антиген) А и агглютинин β (антитела к агглютиногену В). Поэтому ее можно переливать только тем группам, которые не содержат антиген В - это I и II группы.

Третья группа крови Вα (III)

III группа содержит агглютиноген (антиген) В и агглютинин α (антитела к агглютиногену А). Поэтому ее можно переливать только тем группам, которые не содержат антиген А - это I и III группы.

Четвертая группа крови АВ0 (IV)

IV группа крови содержит агглютиногены (антигены) А и В, но содержит агглютининов (антител). Поэтому ее можно переливать только тем, у кого такая же, четвертая группа крови. Но, так как в крови таких людей нет антител, способных склеиться с вводимыми извне антителами, то им можно переливать кровь любой группы. Люди с четвертой группой крови являются универсальными реципиентами.

Группы крови по системе АВО

Методика определения групп крови

Групповая принадлежность крови по системе АВО определяется при помощи реакции агглютинации. В настоящее время существует три способа опреде­ления групп крови по системе АВО:

По стандартным изогемагглютинирующим сывороткам;

С помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А и анти-В).

Определение групп крови по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам

Суть метода сводится к обнаружению в испыту­емой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных сывороток. Для этих целей использу­ется реакция агглютинации. Пробу нужно делать в помещении с хорошим освещением при темпера­туре 15-25° С.

Для проведения пробы необходимы: - Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп О (I), А (II), В (III) и АВ (IV) двух различных се­рий. Сыворотки для определения групп крови изготав­ливают из донорской крови в специальных лаборато­риях. Хранятся сыворотки в холодильнике при темпе­ратуре 4 - 8° С. Срок годности сыворотки указывают на этикетке. На этикетке также указывается титр (то мак­симальное разведение сыворотки, при котором может наступить реакция агглютинации), который должен быть не ниже 1: 32 (для сыворотки В (III) - не ниже 1:16 /32). Сыворотка должна быть прозрачной, без при­знаков гниения. Стандартные сыворотки для удобства подкрашивают в определенный цвет: О (I) - бесцветная (серая), А (II) - синяя, В (III) - красная, АВ (IV) - ярко-желтая. Эти цвета сопутствуют всем этикеткам на пре­паратах крови, имеющих групповую принадлежность (кровь, эритроцитная масса, плазма и др.).

Белые фарфоровые или эмалированные тарел­ки или другие пластинки со смачиваемой поверх­ностью, маркированные, согласно группам крови.

Изотонический раствор хлорида натрия.

Иглы, пипетки, стеклянные палочки (предмет­ные стекла).

Техника проведения реакции.

1. Под соответствующими обозначениями груп­пы крови на тарелку (пластинку) наносят сыворот­ку I, II, III групп в объеме 0,1 мл (одна большая капля диаметром около 1 см). Чтобы избежать оши­бок, наносят две серии сывороток, поскольку одна из серий может иметь низкую активность и не дать четкой агглютинации. Таким образом, получается 6 капель, образующих два ряда по три капли в сле­дующем порядке слева направо: 0 (I), А (II), В (III).

2. Кровь для исследований берут из пальца или из вены. Сухой стеклянной палочкой на пластину в 6 точек последовательно переносят 6 капель иссле­дуемой крови величиной примерно с булавочную го­ловку 0,01 мл (маленькая капля), каждую рядом с каплей стандартной сыворотки. Причем количество сыворотки должно в 10 раз превышать количество исследуемой крови. Затем их осторожно переме­шивают между собой стеклянными палочками с за­кругленными краями.

Возможна и более простая методика: на тарел­ку наносится одна большая капля крови, потом ее забирают оттуда уголком предметного стекла и переносят каждую каплю сыворотки, аккуратно перемешивая ее с последней. При этом кровь каж­дый раз берут чистым уголком стекла, следя за тем, чтобы капли не смешивались.

3. Смешав капли, тарелку периодически покачи­вают. Агглютинация начинается в течение первых 10-30 секунд. Но наблюдение следует вести не ме­нее 5 минут, так как возможна более поздняя агглю­тинация, например с эритроцитами группы А 2 (II).

4. В те капли, где произошла реакция, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия, после чего оценивают результаты реакции.

Реакция агглютинации может быть положитель­ной или отрицательной

При положительной реакции в течение первых 10-30 секунд наблюдают в смеси видимые невоору­женным глазом мелкие красные зернышки (агглю-тинаты), состоящие из склеенных эритроцитов. Мел­кие зернышки постепенно сливаются в более круп­ные зерна или даже в хлопья неправильной формы. При отрицательной реакции капля остается равно­мерно окрашенной в красный цвет.

Результаты реакций двух серий в каплях с сыво­роткой одной и той же группы должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответству­ющей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сы­воротками.

Если все сыворотки дали положительную реакцию, значит, испытуемая кровь содержит оба агглютиногена - А и В. Но в таких случаях, чтобы исключить неспецифическую реакцию агглютинации, следует провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной сывороткой группы АВ (IV).

Определение групп крови моноклональными антителами

Для определения групп крови этим способом используют моноклинальные антитела, которые по­лучают с помощью гибридомной, биотехнологии.

Гибридома - это клеточный гибрид, образованный путем слияния клетки костного мозга (миеломы) с иммунным лимфоцитом, который синтезирует спе­цифические моноклональные антитела. Гибридома обладает способностью к неограниченному росту, ха­рактерна для опухолевой клетки и присущей лим­фоциту способностью синтезировать антитела.

Разработаны стандартные реагенты-моноклональные антитела (МКА): цоликлоны анти-А и анти-В, при­меняемые для определения агглютиногенов эритроци­тов. Цоликлоны представляют собой лиофилизированный порошок красного (анти-А) и синего (анти-В) цвета, который разводят изотоническим раствором хлорида натрия непосредственно перед пробой.

Техника проведения.

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соот­ветствующими надписями: анти-А или анти-В. Ря­дом с каплями антител следует нанести по одной маленькой капле исследуемой крови. После переме­шивания компонентов наблюдают за реакцией агг­лютинации в течение 2-3 минут. Оценка результа­тов очень проста.

Определение групповой принадлежности крови может сопровождаться ошибками, которые ведут к неправильной трактовке результатов. Можно выде­лить три основные группы ошибок: ошибки, свя­занные с низким качеством реагентов; техничес­кие ошибки; ошибки, связанные с особенностями Схема оценки результатов определения групп крови спомощью моноклональных антител(цоликлоны анти-А и анти-В)исследуемой крови. Первых двух можно избежать, строго соблюдая описанные выше требования к сыво­ротке, условиям проведения реакции и др. Третья группа связана с явлением неспецифической панагглютинации (феномен Томсена), сущность которого состоит в том, что сыворотка при комнатной темпера­туре дает агглютинацию со всеми эритроцитами, даже со своими собственными (аутоагглютинация), а эрит­роциты в то же время дают агглютинацию со всеми сыворотками, даже с сывороткой группы АВ. Подоб­ное явление описано при ряде заболеваний: болезнях крови, спленомегалии, циррозе печени, инфекционных заболеваниях и др. Описана также панагглютинация и аутоагглютинация у здоровых людей.

Явление панагглютинации и аутоагглютинации наблюдается только при комнатной температуре. Если определение групповой принадлежности про­водить при температуре 37° С, они исчезают.

Нужно строго помнить, что во всех случаях не­четкого или сомнительногскрезультата следует про­вести повторное определение групп крови при по­мощи стандартных сывороток других серий, а так­же перекрестным способом.

66. Методы определения групп крови по системам аво и резус.

Для проведения исследования необходимы стандартные гемагглютинирующие сыворотки I (О), II (А), III (В), IV (АВ), причем первые три варианта сыворотки должны быть представлены двумя сериями.

Сыворотка должна быть пригодной для использования, для этого обязательно проверяют соответствие ее сроку годности, указанному на этикетке сыворотки, определяют визуально ее состояние. Нельзя использовать сыворотку, если она является мутной, содержит посторонние примеси, хлопья, взвесь, изменила цвет.

Сыворотка считается пригодной для использования, если она является прозрачной, ампула имеет этикетку, на которой указаны основные ее свойства (серия, срок годности, групповая принадлежность, цветная маркировка соответственно групповой принадлежности), ампула не повреждена, не вскрыта.

Необходимы чистая тарелка, которую необходимо разделить на четыре части, отметив соответствие каждой определенной группе крови, игла-скарификатор, стерильные ватные тампоны, чистое сухое обезжиренное предметное стекло, спирт. На тарелку в соответствии с маркировкой наносят по капле каждой сыворотки. Затем кожу подушечки четвертого пальца левой руки обрабатывают стерильным ватным тампоном со спиртом. С помощью скарификатора прокалывают кожу, удаляя первую выступившую каплю крови (примесь к ней спирта и тканевой жидкости может исказить результаты исследования). Следующую каплю крови забирают уголком предметного стекла, для каждой капли сыворотки – чистым уголком стекла. Для исследования к капле гемагглютинирующей сыворотки добавляют каплю крови в соотношении 10: 1. Затем, аккуратно поворачивая и покачивая тарелку, производят перемешивание крови. Агглютинация обычно выявляется в виде выпадения хлопьев, которые хорошо визуализируются. Для уточнения результата к капле добавляют изотонический раствор хлорида натрия, после чего с достаточной достоверностью оценивают результат.

Одним из обязательных условий проведения исследования является соблюдение температурного режима.

Оптимальной является температура 20 – 25 оС, поскольку уже ниже 15 оС отмечается холодовая агглютинация, резко нарушающая специфичность данной пробы, а при температуре окружающей среды выше данного интервала скорость реакции агглютинации резко замедляется.

Если гемагглютинация происходит в капле с сыворотками I (О), III (В), но не происходит с сывороткой II (А), причем результат аналогичен с сыворотками двух сывороток, это означает, что исследуемая кровь принадлежит III (B) группе по системе АВО.

Если гемагглютинация происходит в капле с сыворотками I (О), II (А), но не происходит с сывороткой III (В), это означает, что исследуемая кровь принадлежит II (А) группе по системе АВО.

Но возможна и такая ситуация, когда гемагглютинация не происходит ни с одной из исследуемых сывороток, причем обеих серий. Это означает, что исследуемая кровь не содержит агглютиногенов и принадлежит к I (О) группе по системе АВО.

Если же агглютинация происходит со всеми сыворотками, причем обеих серий, это означает, что исследуемая сыворотка содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к IV (АВ) группе по системе АВО.

Экспресс-метод определения групповой принадлежности крови по системе резус. Для исследования необходимо иметь стандартную антирезусную сыворотку, принадлежащую IV (АВ) группе по системе АВО, чашку Петри, изотонический раствор хлорида натрия, 30%-ный раствор реополиглюкина, чистое сухое обезжиренное предметное стекло. Вначале необходимо развести стандартную антирезусную сыворотку раствором реополиглюкина и нанести ее каплю на чашку Петри. Кроме того, на чашку Петри наносят каплю сыворотки IV (АВ) группы, которая не содержит антител. Забор крови производят аналогично способу, описанному при определении системы АВО. Каплю крови забирают с помощью угла предметного стекла, добавляют к капле сыворотки и аккуратно перемешивают. Другим углом забирают каплю для добавления к другой сыворотке и также перемешивают. Предварительный результат оценивают через 4 мин, затем к каждой капле необходимо добавить каплю изотонического раствора хлорида натрия, через 2 мин оценивается окончательный результат. Если в обеих каплях не наблюдается выпадения хлопьев агглютинации, это свидетельствует о том, что исследуемая кровь резус-отрицательная. Если же агглютинации произошла с обеими сыворотками, результат исследования нельзя считать достоверным. Наконец, если агглютинация произошла с антирезусной сывороткой, но не произошла с другой, контрольной, кровь считается резус-положительной.

67. Современные правила переливания крови по группам системы АВО и системы резус. Обязанности врача, переливающего кровь

Необходимость инфузии крови или её компонентов, а также выбор метода и определение дозировки переливания, определяются лечащим врачом на основании клинических симптомов и биохимических проб. Врач, осуществляющий переливание, обязан вне зависимости от данных предыдущих исследований и анализов, лично произвести следующие исследования: определить группу крови больного по системе ABO и сравнить полученные данные с историей болезни; определить группу крови донора и сравнить полученные данные с информацией на этикетке контейнера; проверить совместимость крови донора и больного; получить данные биологической пробы. Запрещается трансфузия крови и её фракций, не прошедшей анализы на СПИД, сывороточный гепатит и сифилис. Гемотрансфузия осуществляется с соблюдением всех необходимых асептических мер. Допускается инфузия крови или её фракций исключительно при совпадении резус-фактора донора и реципиента. В случае необходимости возможна инфузия резус-отрицательной крови первой группы человеку с любой группой крови в объёме до 0,5 л (только взрослым). Резус-отрицательную кровь второй и третьей группы можно трансфузировать человеку со второй, третьей и четвертой группой, вне зависимости от резус-фактора. Человеку с четвертой группой крови положительного резус-фактора можно переливать кровь любой группы. Эритроцитную массу резус-положительной крови первой группы можно инфузировать пациенту с любой группой при резус-положительном факторе. Кровь второй и третьей группы с резус-положительным фактором можно инфузировать человеку с четвертой резус-положительной группой. Так или иначе, перед трансфузией обязательно проведение теста на совместимость. При обнаружении в крови иммуноглобулинов редкой специфики необходим индивидуальный подход к выбору крови и проведение специфических тестов на совместимость.

Пробы на совместимость крови донора и реципиента перед переливанием.

Наконец, если выяснено, что кровь донора и кровь реципиента совпадают по системам АВО и резусу, для переливания необходимо произвести биологическую пробу на совместимость. Ее проводят с самого начала переливания крови. Подсоединив систему для переливания крови, открывают зажим и вводят примерно 20 мл крови донора струйно, затем зажим закрывают и внимательно наблюдают за реакцией пациента в течение 3 мин. Биологическая несовместимость крови донора и пациента в клинической практике встречается нечасто, но может быть очень опасной для здоровья реципиента. О наличии ее можно говорить, если наблюдаются гиперемия лица, психомоторное возбуждение, пациент стремится встать, могут отмечаться неадекватное поведение, тахикардия и тахипноэ, снижение артериального давления. Учащение дыхания может сочетаться с ощущением нехватки воздуха. Подобная реакция является абсолютным противопоказанием для переливания данному реципиенту крови данного донора. Однако это не исключает использования других порций донорской крови от данного лица другим пациентам. Если проведение биологической пробы не сопровождается появлением подобной реакции при повторении ее дважды, она считается пригодной для переливания. Трансфузию продолжают, однако в течение всего времени необходимо тщательно наблюдать за состоянием реципиента, его артериальным давлением, температурой тела, общим состоянием, частотой и ритмом дыхания, оценивать частоту и качество пульса, обращать внимание на субъективные ощущения пациента: чувство жара, ощущение нехватки воздуха, кожный зуд, боли в области поясницы, озноб и др. Подобный мониторинг состояния больного проводится в течение 4 ч после переливания крови, и если через это время реакции на переливание не отмечается, то проведенная гемотрансфузия считается успешной, проведенной без осложнений.

Определение группы крови системы АВ0

Используют стандартные сыворотки I II III IV группы крови 2-х серий.

Надеть передник, маску, очки, перчатки, нарукавники.

Методика проведения.

1. На чистую, сухую, обезжиренную тарелку капают по одной капле стандартных сывороток 2-х серий (6 капель). Каждая сыворотка капается отдельной пипеткой. Пипетки маркируются и находятся во флаконах с физ.раствором.

2. Рядом с каплей стандартной сыворотки палочкой или отдельной пипеткой наносится капля крови (соотношение сыворотка-кровь 10:1).

3. Капли тщательно перемешиваются отдельными палочками.

4. Покачивают тарелку и наблюдают результаты в течение 5минут. По истечению 3минут для исключения ложной агглютинации вносят по капле физ.раствора и продолжают наблюдение.

Определение результатов.

Сыворотки всех групп не дали реакции-исследуемая кровь относится к группе 0(I)

Сыворотки групп 0 (I) и В (III) дали положительную реакцию, сыворотка групп А (II) агглютинацию эритроцитов не вызывала – исследуемая кровь относится к группе А (II)

Сыворотки групп О(I) и А (II) дали положительную реакцию, сыворотка группы В (III) не дала реакцию – кровь отосится к группе

Сыворотки всех групп дали положительную реакцию – кровь можно отнести к группе АВ (IV) . нотолько в том случае, если при проведении контроля исследуемых эритроцитов со стандартной сывороткой группы АВ (IV) реакции агглютинации не будет. Положительная агглютинация с сывороткой АВ (IV)означает наличие неспецифической агглютинации.

Определение группы крови системы АВО моноклональными антителами .

Это современный метод определения группы крови АВО моноклональными реагентами(цоликлонами анти-А и анти-В).

Методика определения: Надеть передник, маску, перчатки, нарукавники

1. на тарелку в две ячейки капают по 1 каплецоликлоны анти-А и анти-В

2. Рядом с каплями антител наносят исследуемую кровь в соотношении сыворотка –кровь 10:1.

3. Смешивают реагенты отдельными стеклянными палочками.

4. Наблюдают за результатом 2,5 минут.

Определение результатов:

Агглютинации нет ни с цоликлоном анти-А, ни с цоликлоном анти-В-

кровь принадлежит к группе О(I)

Агглютинация наблюдается только с цоликлоном анти-А- кровь принадлежит к группе А (II)

Агглютинация наблюдается только с цоликлоном анти-В – кровь принадлежит к группе В (III)

Агглютинация наблюдается как с цоликлоном анти-А, так и с цоликлоном анти-В – кровь принадлежит к группе АВ (IV)

5. Пробы перед переливание крови .

Надеть маску, очки, передник, перчатки.

Из вены больного берут 5мл крови, центрифугируют и получают сыворотку.

А) Проба на индивидуальную совместимость: наносят 2-3 капли сыворотки на планшетку и добавляют каплю крови донора (10:1). Кровь смешивают с сывороткой сухой стеклянной палочкой, планшетку слегка покачивают и наблюдают за результатом.

Результат: отсутствие агглютинации-кровь совместима, есть агглютинация – кровь не совместима.

Б) Проба на резус-совместимость:

Написать на чистой пробирке фамилию, имя, отчество рецепиента и его группу крови, а так же номер флакона донора.

Внести на дно пробирки пастеровской пипеткой 2 капли сыворотки рецепиента, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33% р-ра полиглюкина.

Перемешайте полученную в пробирке смесь и, наклоняя пробирку до горизонтального положения, поворачивайте ее таким образом, чтобы содержимое растекалось по стенкам пробирки в нижней ее трети.

По истечении 5 минут долейте в пробирку2-3 мл изотонического раствора натрия хлорида и перемешайте содержимое путем 2-3 кратного переворачивания пробирки.

Результат:

1. Наличие агглютинации эритроцитов – кровь донора несовместима с кровью больного.

2. Нет признаков агглютинации – кровь совместима.

В) Биологическая проба.

Техника проведения:

Струйно переливать 10-15мл крови (эритроцитарной массы, плазмы), затем в течение 3-х минут наблюдать за больным. При отсутствии клинических проявлений реакции или осложнений (учащения пульса, дыхания, появления одышки, затрудненного дыхания и гиперемии лица ит.д.) вводят вновь 10-15 мл крови (эритроцитарной массы, плазмы и т. д.) и в течение 3-х минут наблюдают за больным. Такую же процедуру повторяют и в 3-й раз. Отсутствие реакции у больного после 3-х кратной проверки, является основанием для продолжения трансфузии. 10-15 мл крови оставляют во флаконе и хранят 1сутки в холодильнике.

6.После переливания крови реципиент в течение 2-часов соблюдает постельный режим и наблюдается врачом. Ежечасно ему измеряют температуру тела, АД, фиксируют эти показания в истории болезни. Контролируется наличие мочевыделения и нормального цвета мочи. На следующий день после переливания обязательно производят общий анализ мочи и крови. Записывается в историю болезни показание к гемотрансфузии и оформляется протокол переливания, содержащий следующие сведения:

– Ф.И.О больного

Группа крови и резус-принадлежность больного

Паспортные данные флаконов крови или компонентов, фамилию и инициалы донора, группу и резус-принадлежность крови, номер флакона, дату заготовки.

Результат контрольного определения группы крови больного

Результаты контрольного определения группы каждого флакона крови и ее компонентов.

Результаты проб на совместимость крови доноров и реципиента при комнатной температуре

Метод и результаты проб на совместимость при температуре

Результаты биологических проб

Состояние больного во время и после трансфузии.

/ 29

29 Методы определения групп крови и резус-фактора. Профилактика возможных ошибок

Определение групп крови с помощью стандартных сывороток. В лунки планшета для определения групп крови последовательно наносят пипетками по одной крупной капле стандартной сыворотки групп 0(1), А(П), В(Ш) двух различных серий каждой группы. Затем наносят в каждую лупку по капле исследуемой крови, в 5 - 10 раз меньшую сыворотки. Сухими стеклянными палочками или путем покачивания планшета смешивают стандартные сыворотки и исследуемую кровь. Через 5 минут оценивают результат (табл. 2).

Таблица 2

Определение групп крови с помощью стандартных сывороток

Группа исследуемой крови	Стандартные сыворотки

Определение групп крови по стандартным эритроцитам. В лунки планшета наносят большие капли плазмы исследуемой крови. Рядом с каждой каплей плазмы последовательно наносят по небольшой капле стандартных эритроцитов групп 0(1), А(II), В(III). Капли перемешивают покачиванием планшета. Через 5 минут к каждой капле смеси добавляют по 1 капле физиологического раствора и учитывают результат.

Таблица 3

Определение групп крови с помощью стандартных эритроцитов

Группа исследуемой крови	Стандартные эритроциты

Определение резус-фактора. На дно сухой пробирки наносят 1 большую каплю универсального реагента анти-резус, затем добавляют такую же каплю исследуемой крови. После встряхивания пробирки производят перемешивание сыворотки анти-резус и крови в течение 5 минут по стенкам пробирки, после чего добавляют 5 - 7 мл физиологического раствора. Наличие агглютинации свидетельствует о присутствии резус-фактора.

Определение групп крови с помощью цоликлонов. Цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ предназначены для определения групп крови человека системы АВО в прямых реакциях гемагглютинации и применяются взамен или параллельно с поликлональными иммунными сыворотками.

Моноклональные анти-А и анти-В антитела продуцируются двумя мышиными гибридомами и принадлежат к иммуноглобулинам класса М. Цоликлоны изготовляются из асцитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом. Цоликлон анти-АВ представляет собой смесь моноклональных анти-А и анти-В антител.

Цоликлоны выпускаются в жидкой форме во флаконах объемом 5 - 10 мл. Цоликлон анти-А - желтого цвета, анти-В - синего, анти-АВ - бесцветный. В качестве консерванта применяется азид натрия.

Техника определения групп крови. Определение производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта, в том числе из пальца. Используется метод прямой гемагглютинации на пластине или планшете, определение производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15 - 25 X.

Наносят на пластину или планшет индивидуальными пипетками цоликлоны анти-А, анти-В и анти-АВ по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями.

Рядом с каплями антител наносят по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01 - 0,03 мл).

Смешивают кровь с реагентом, покачивая планшет.

Наблюдают за ходом реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании планшета в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3 - 5 секунд, но наблюдение следует вести 3 минуты ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агтлютинаты видны в виде мелких красных агретатов, быстро смешивающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

Интерпретация результатов реакции агглютинации с цоликлонами представлена в табл. 4.

Таблица 4

Определение групп крови с помощью цоликлонов

Группа исследуемой крови	Стандартные эритроциты

Примечание: знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) - се отсутствие

При положительном результате реакции агглютинации со всеми гремя цоликлонами необходимо исключить спонтанную неспецифическую аглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого смешивают на плоскости 1 каплю исследуемых эритроцитов с каплей физиологического раствора. Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.

Определение резус-фактора с помощью цоликлона. В лупку планшета наносят 1 большую каплю цоликлона анти-Д-супер т рядом наносят 1 маленькую каплю исследуемой крови.

Покачивая планшет, смешивают кровь с цоликлоном. За ходом реакции наблюдают в течение 3 минут. Наличие агглютинации свидетельствует о присутствии резус-фактора.